【產(chǎn)品簡介】

Haoke? PEI Transfection Reagent (MW40000)是一種高性能陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑，適用于常見貼壁或懸浮的多種細(xì)胞的質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染，包括 HEK293，MCF-7，RAW 264.7，HUVEC，HBE，THP-1，PC-3，A549，Hela，BJ，U-87 MG，Caco-2等。PEI 40000結(jié)構(gòu)明確、分子量均一，可實現(xiàn)高效、高重復(fù)性的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。其兼具優(yōu)異的陽離子聚合物/DNA復(fù)合物形成能力和轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)DNA的快速釋放能力，保證了優(yōu)異的轉(zhuǎn)染性能和極低的細(xì)胞毒性。

【儲存方式】

2-8oC保存。

【使用方法】

操作前注意事項

1. 轉(zhuǎn)染試劑與DNA核酸用量最優(yōu)比例根據(jù)不同實驗需要摸索。對大多數(shù)細(xì)胞來而言，最優(yōu)比例范圍為：每1 μg DNA使用1.5~4 μL體積的PEI 40000轉(zhuǎn)染試劑。
2. 本產(chǎn)品僅用于科研。

不同培養(yǎng)皿/瓶推薦試劑用量

操作步驟

轉(zhuǎn)染操作（以 6 孔板貼壁細(xì)胞為例）：
1. 接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度在70%~80%為宜。
2. 配制轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物
2.1?對于每孔細(xì)胞，使用100 μL無血清培養(yǎng)基（如Opti-MEM等）或高壓滅菌去離子水稀釋2 μg目的DNA，充分混勻成DNA稀釋液;
2.2 立刻向100 μL的DNA稀釋液中加入4 μL的PEI 40000轉(zhuǎn)染試劑，輕輕混勻;
2.3 在室溫下孵育10~15 min，使得形成DNA-PEI轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物。
3.?細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3.1 在形成復(fù)合物過程中，移除細(xì)胞生長培養(yǎng)基，每孔中加入2 mL新鮮預(yù)熱的完全培養(yǎng)基;
3.2 直接將100 μL DNA-PEI復(fù)合物加入細(xì)胞中，搖動培養(yǎng)板，輕輕混勻；
3.3 在37℃, 5% CO₂條件下進(jìn)行培養(yǎng)，待合適時間點進(jìn)行轉(zhuǎn)染結(jié)果的檢測。